بررسی و تدوین پروتکلی مناسب جهت انجماد کورتکس تخمدان انسان -*****

چکیده: در سال های اخیر با پیشرفت علم پزشکی میزان بهبود بیماران سرطانی افزایش یافته است. روش های رایج جهت درمان سرطان به ویژه شیمی درمانی و پرتو درمانی اثرات مخربی برسلول های جنسی می گذارد و در نتیجه موجب ناباروری بیمار می شود. در این گونه موارد جهت حفظ باروری بیماران سرطانی سلول های جنسی یا سلول های تولید کننده سلول جنسی منجمد شده و به این ترتیب امکان حفظ و ذخیره سازی طولانی مدت آنها فراهم می گردد. در این موارد برای زنان مواجه شده با این مشکل قطعاتی از کورتکس تخمدان، پیش از شروع درمان برداشته شده و منجمد می شود. مطالعه حاضر به منظور بررسی و تدوین پروتکلی مناسب جهت انجماد کورتکس تخمدان انجام شده است. انجماد بافت تخمدان با دو روش انجماد آهسته و انجماد شیشه ای انجام می گیرد. دراین بررسی با روش انجماد شیشه ای، کورتکس تخمدان طبق چهار تکنیک مختلف منجمد شد و در هر تکنیک نوع محلول انجماد و مدت زمان قرار گرفتن نمونه ها در معرض آن متفاوت بود. نمونه های بافت تخمدان درون محیط mem? قرار گرفته و به آزمایشگاه منتقل شدند، سپس کورتکس تخمدان جدا و به قطعات کوچکی تقسیم گردید. قطعات جدا شده طبق تکنیک های مورد نظر منجمد شدند و درون تانک ازت قرار گرفتند. پس از گذشت یک هفته تا یک ماه قطعات بافت تخمدان ذوب شدند. به منظور بررسی اثر انجماد روی قطعات فریز - دفریز شده، از دو تکنیک استفاده شد، یکی بررسی میکروسکوپی قطعات بافت تخمدان و دیگری کشت قطعات . در بررسی میکروسکوپی، تعداد و مرفولوژی فولیکول ها مورد مطالعه قرار گرفت و پس از کشت قطعات منجمد شده ی بافت تخمدان در محیط کشت غلظت هورمون های پروژسترون و بتا- استرادیول به روش کمیلومینسانس اندازه گیری شد. نتایج حاصل از مشاهدات میکروسکوپی مشخص کرد که تعداد فولیکول های نرمال در قطعات منجمد شده طبق یکی از تکنیک های انجماد شیشه ای از گروه های دیگر بیشتر بود و تفاوت معنی داری با کنترل نداشت (?/??>p) . همچنین مرفولوژی فولیکول!های موجود در قطعاتی که طبق این تکنیک منجمد شدند طبیعی بود و مانند فولیکول های بافت کنترل شکل گرد و هسته خود را حفظ کرده و غشای سیتوپلاسمی سالم داشتند. نتایج حاصل از سنجش هورمونی، در تمامی تکنیک ها، افزایش سطح هورمون پروژسترون و بتا استرادیول را در طی کشت نشان داد و همچنین تفاوت معنی داری در میزان غلظت هورمون ها بین نمونه های کنترل و منجمد شده وجود نداشت (0/0?<p). با توجه به بالا بودن درصد فولیکول های نرمال در نمونه های منجمد شده و همچنین افزایش غلظت هورمون ها در طی کشت، تکنیک سوم از روش انجماد شیشه ای به عنوان روشی موثر و کارآمد جهت انجمادکورتکس تخمدان معرفی می شود و می تواند برای حفظ باروری بیماران سرطانی پیشنهاد شود. کلمات کلیدی: انجماد بافت تخمدان – انجماد شیشه ای- انجماد آهسته – کشت بافت تخمدان